Хроматографический блок BE2 Дидактическое оборудование Оборудование для профессиональной подготовки Биохимическая инженерия
ОПИСАНИЕ
Хроматография — широко используемый процесс разделения в областях химической и биохимической инженерии.
Это высокоселективный процесс, способный разделять компоненты со схожими физическими и химическими свойствами.
Это важно как в масштабах обработки, так и в масштабах анализа процесса.
BE2 состоит из настольного блока, на котором установлены две хроматографические колонки из боросиликатного стекла длиной 250 мм и диаметром 10 мм. Обе оснащены регулируемыми концевыми элементами, позволяющими исследовать различные высоты слоя. В верхней части каждой колонки находятся инжекторы с перегородками, позволяющие вводить образец на поверхность колонки. Колонки питаются трехканальным перистальтическим насосом восьмироликовой конструкции для обеспечения плавного потока. Насос имеет привод с переменной скоростью, и можно использовать широкий диапазон отверстий трубок, что обеспечивает очень широкий диапазон расхода.
Переключающие клапаны позволяют оператору легко выбирать нужную колонку для работы. Перед входом в колонки устанавливается ловушка для пузырьков, чтобы предотвратить попадание воздуха. Выход из колонки проходит в УФ-оптическую проточную ячейку для измерения элюирования образца. Жидкость, выходящая из проточной ячейки, может быть либо направлена в слив, либо собрана с помощью коллектора фракций, который контролируется таймером и имеет емкость для сорока восьми пробирок по 3 мл.
Важно, чтобы все буферы и образцы, введенные в колонку, были отфильтрованы и дегазированы для защиты колонки. Оборудование, необходимое для этого, является стандартным лабораторным оборудованием, оно доступно как опция (BE2-1) при необходимости.
BE2-1 состоит из держателя мембранного фильтра, вакуумной колбы, водяного вакуумного насоса и мембранных фильтров. Система фильтрации образца состоит из шприца и одноразовых мембранных фильтров. Шприцы и иглы для инъекции образца также включены.
Методы, необходимые для жидкостной хроматографии, требуют некоторой практики для достижения воспроизводимых результатов. Поэтому пользователям, не имеющим опыта в этой области, рекомендуется пройти обучение.
Установка хроматографии BE2 демонстрирует промышленно важный тип хроматографии — жидкостную хроматографию низкого давления. Несколько разновидностей могут быть продемонстрированы с помощью BE2, включая ионообменную, гель-фильтрационную, гидрофобную и аффинную хроматографию. Каждый из этих типов использует свой метод разделения, а именно заряд частиц, размер и форму частиц, гидрофобность молекул и биологическую специфичность соответственно.
Система BE2 включает в себя подробные экспериментальные процедуры для гель-фильтрационную хроматографию, особенно в отношении разделения белков и красителей. Однако ее также можно использовать для исследования других типов жидкостной хроматографии низкого давления.
Генеральная гель-фильтрация использует пористые бусины для разделения частиц разных размеров. Диапазон размеров пор в бусинах определяет, полностью ли исключены частицы, частично исключены или имеют ли они полный вход во все бусины. Частицы, которые полностью исключены, имеют самое короткое время пребывания в колонке, тогда как частицы, которые полностью вошли в бусины, имеют самое длинное время пребывания. Частично исключенные частицы имеют время пребывания между этими двумя. На этой основе разделяются частицы разных размеров.
Экспериментальное содержание
Понимание принципов и практик жидкостной хроматографии, включая:
Упаковка колонки
Применение образца
Разработка колонки
Анализ и сбор фракций
Понимание факторов, влияющих на эффективность разделения
Понимание измерения концентрации белка с помощью УФ-анализов
Подробные учебные упражнения включены для демонстрации студентам важных аспектов гель-фильтрационной хроматографии. Предоставленная информация включает сведения о подходящих гелевых матрицах, буферах, белках и т. д., а также подробные экспериментальные протоколы
Хотя эксперименты относятся только к методу гель-фильтрации, система подходит для использования с другими системами жидкостной хроматографии низкого давления, такими как ионообменная, аффинная и гидрофобная
Система включает проточную УФ-ячейку для измерения концентрации белка. Уровень обнаружения составляет 0,1 мг/мл белка (бычий сывороточный альбумин)
Понимание протоколов работы систем жидкостной хроматографии низкого давления
Визуальная демонстрация гель-фильтрационной хроматографии с использованием красителей
Определение влияния скорости потока и длины колонки на разделение и концентрацию продукта